Polymer Science and Technology Vol. 23, No, 3 특 집 Vol. 23, No. 3 289 유전자 클로닝 기법에 의한 유전자 전달체의 생산 Production of Gene Carriers Using Gene Cloning Technology 오빛나⋅이민형 | Binna Oh⋅Minhyung Lee Department of Bioengineering, College of Engineering, Hanyang University 17 Haengdang-dong, Seongdong-gu, Seoul 133-791, Korea E-mailminhyung@hanyang.ac.kr 오빛나 2011 건국대학교 생명과학과 학사 2011-현재 한양대학교 생명공학과 석사과정 이민형 1992 서울대학교 화학과 학사 1994 서울대학교 화학과 석사 1999 서울대학교 화학과 박사 1999-2002 유타대학교 약대 박사후 연구원 2002-2003 유타대학교 약대 연구조교수 2003-2005 인하대학교 의대 전임강사 2005-현재 한양대학교 생명공학과 조교수/부교수 1. 서론 유전자 치료는 치료유전자를 세포 안으로 전달하여 질병을 치료하는 방법을 말한다. 현재 혈우병 등의 유�...

특 집 | 유전자 클로닝 기법에 의한 유전자 전달체의 생산 290 고분자 과학과 기술 Polymer Science and Technology 그림 1. HMGB-1, HMGB-2, HMGB-1A의 구조. 양이온성 펩타이드를 유전자 전달체로서 사용할 경우 다 음과 같은 장점을 가지고 있다. 첫째, 펩타이드 전달체의 경우 핵산과 전기적 인력을 통하여 복합체를 형성하고, 핵 산을 응축하여 작은 크기의 입자를 만들어 낼 수 있다. 둘 째, 펩타이드 전달체에 수용체 특이적 리간드를 접합하면, 수용체에 특이적으로 결합하여 수용체 특이적 엔도사이토 시스를 통해 효율적으로 유전자를 세포 내로 전달할 수 있 다.4-6 셋째, protein transduction domain PTD 로부터 유래한 펩타이드 서열은 핵산-전달체 복합체가 엔도좀에 서 라이소좀으로 가는 경로를 통해 복합체가 분해되는 것 으로부터 벗어날 수 있도록 하여 유전자 전달 효...

특 집 | 유전자 클로닝 기법에 의한 유전자 전달체의 생산 292 고분자 과학과 기술 Polymer Science and Technology HinDIII 그림 2. HMGB-1A 발현벡터. 을 하며, 이러한 능력이 세포 내 전달 효율을 높인다.28 여 기에 SV40 large T antigen NLS를 융합한 펩타이드를 결 합한 histone H1은 본래의 H1의 유전자 전달 효율을 개선 하였다. 또한, 다른 연구에서는 human linker histone H1.4를 DNA 재조합법을 이용하여 여러 조각으로 나누어 발현하고 정제하여, 그 중에 유전자 전달 효율이 높은 조 각을 스크리닝하였다.29 그 중에 277657번 아미노산으로 구성된 H1.4F 조각이 가장 우수한 효과를 보여주었으며, 이것은 lipofectamine보다 우수한 유전자 전달 효율을 가 지고 있다. 뿐만 아니라 H1.4F는 DNA 외에도 siRNA 전 달에서도 우수한 효과를 보여주어 유전자 전달분야에서 다양한 응용성을 보여주었다.29 ...

특 집 | 유전자 클로닝 기법에 의한 유전자 전달체의 생산 294 고분자 과학과 기술 Polymer Science and Technology MMolecular weight marker Lane 1IPTG induction 후 박테리아로부터 나온 crude lystes Lane 2Nickel chelate affinity chromatography에 의해서 정제된 HMGB-1A Lane 3Cationic exchange chromatography에 의해서 정제된 HMGB-1A 그림 4. 정제된 HMGB-1A의 SDS-PAGE 분석. 그림 5. Gel retardation assaysiRNA/HMGB-1A 복합체는 ethidium bromide가 들어있는 3% agarose gel에서 분석되었다. 고정된 양의 siRNA 에 무게비를 달리하여 HMGB-1A를 추가하였다. 20분간 상온에서 방치하여 복합체 형성을 유도한 후, agarose gel에서 전기영동을 통하여 분석하였다. 그림 6. Cytotoxicity assayHMGB1 A와 TAT-HMGB-1A의 독성을 측정하 기 위해서 MTT assay를 수행하였다. 그 결과 HMGB -1A와 TAT-HMGB-1A 는 Raw264.7 cell에서 독성을 보이지 않았으나 PLL은 높은 독성을 ...

일반총설 Polymer Science and Technology Vol. 23, No. 3 296 고분자 과학과 기술 Polymer Science and Technology 최창훤 2011 금오공과대학교 고분자공학과 학사 2011-현재 금오공과대학교 에너지융합소재공학부 석사 김영민 2010 금오공과대학교 고분자공학과 학사 2012 금오공과대학교 고분자공학과 석사 장진해 1978 고려대학교 농화학과 학사 1982 고려대학교 화학과 석사 1989 고려대학교 화학과 박사 1990-1991 미국 메사츄세츠대학 고분자공학과 연구교수 1996-1997 미국 메사츄세츠대학 고분자공학과 연구교수 2002-2003 미국 코넬대학 재료공학과 연구교수 1983-현재 금오공과대학교 에너지융합소재공학부 교수 그림 1. 연도 별 PI의 사용분야. 플렉시블 디스플레이용 무색투명 폴리이미드 필름 Colorless and Transparent Polyimide Films for Flexible Displays 최창훤·김영민·장진해 | Chang-Hwon Choi·Youn...